A técnica de microscopia de Depleção de Emissão Estimulada (STED) é uma poderosa ferramenta de super resolução que permite a observação de estruturas de fluorescência com uma resolução espacial abaixo do limite de difração. O Alba STED utiliza a abordagem de excitação pulsada e depleção pulsada (pSTED) para alcançar uma resolução lateral de 60 a 100 nm. Um aumento adicional na resolução é proporcionado pela informação de tempo de vida adquirida através do FastFLIM (imagem de tempo de vida de domínio de frequência digital) e pelo uso do gráfico de fásor: os fótons emitidos pelos fluoróforos ativados pelo laser de excitação apenas (decaimento de fluorescência inerente) são eficientemente separados dos fótons emitidos pelos fluoróforos parcial ou totalmente ativados pelo laser STED (com tempos de decaimento mais curtos). Uma resolução de 30 nm é medida em amostras padrão. Além disso, a combinação de pSTED e análise de tempo de vida através do gráfico de fásor permite a separação de dois fluoróforos com padrões de emissão semelhantes, mas com tempos de decaimento diferentes (excitação de duplo rótulo).
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